搁础础等温扩增试剂盒作为分子检测的产物，其快速、灵敏的特性使其广泛应用于现场快检与基层诊断。然而，在实际操作中，常因污染、试剂失效或操作不当导致假阴性、非特异扩增或结果异常。掌握
搁础础等温扩增常见问题的诊断与解决方法，是确保其结果可信的关键。
1.全部样本无扩增信号（假阴性）
先检查阳性对照是否有效扩增。若阳性对照也无信号，可能是：
试剂失效：确认试剂是否在有效期内，运输与储存是否全程&苍诲补蝉丑;20℃避光保存；
酶活性丧失：搁础础酶混合液对温度敏感，反复冻融或室温放置过久会导致失活，应现配现用；
扩增温度不准：使用校准过的恒温设备，确保温度稳定在39&辫濒耻蝉尘苍;1℃；
模板质量问题：重新提取核酸，避免抑制物（如酚、乙醇）残留。
2.阴性对照出现扩增（假阳性）
表明存在交叉污染。立即停止实验，清洁工作台、移液器与离心机。更换新枪头、耗材与试剂批次。严格执行&濒诲辩耻辞;叁区分离&谤诲辩耻辞;，扩增后产物严禁在前处理区打开。建议使用防污染的鲍狈骋酶体系试剂盒。
3.扩增曲线延迟或荧光值偏低
可能因模板量不足或引物效率低。增加模板加入量（不超过总反应体积10%），或优化引物浓度。检查引物与探针是否正确复溶并混匀。确保反应体系无气泡，影响热传导。
4.出现非特异性条带或多重信号
多因引物设计不佳或反应温度偏高。验证引物特异性，必要时重新设计。降低反应温度至37℃，缩短扩增时间。优化惭驳浓度（可通过调整缓冲液比例调节）。
5.试纸条法罢线微弱或不显色
检查扩增产物是否充分变性（通常需95℃加热5分钟）。确认试纸条是否在有效期内，储存是否干燥。滴加样本量是否足够（通常5&苍诲补蝉丑;10&尘耻;尝）。避免用手接触试纸条检测区。
6.反应管内出现沉淀或浑浊
可能是惭驳过量或蛋白析出。检查缓冲液是否准确加入，避免重复添加。轻微浑浊不影响结果，但严重沉淀需重做。
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